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Durchflusszytometrie (FACS ®)

Dr. Steffen Schmitt


© dkfz.de

Dank der technischen Weiterentwicklung sowie durch den Einsatz neuartiger Fluoreszenzfarbstoffe hat sich der Einsatzbereich der Durchflusszytometrie in den letzten Jahren ständig erweitert. Ursprünglich als Methode in der Immunologie und Hämatologie (Routine-Diagnostik) entwickelt, wird die Durchflusszytometrie heute auch vermehrt in anderen biowissenschaftlichen Bereichen und in der medizinischen Grundlagenforschung eingesetzt.

Grundlage einer FACS®-Analyse (fluorescence activated cell sorting) ist eine (gefärbte) Einzelzellsuspension (oder andere lösliche Partikel), wobei diese einzeln einen fokussierten Laserstrahl passieren und das dabei erzeugte, charakteristische Streu- und Fluoreszenzlicht separat detektiert wird. Mit dieser Methode lassen sich relativ große Zellzahlen in vergleichsweise kurzer Zeit analysieren (bis zu 30.000 Zellen/ Sekunde). Die Zahl der analysierbaren Parameter steigt mit der Zahl der eingesetzten Laser und Fluoreszenzfarbstoffe. Das neueste Zellsortiergerät am DKFZ kann auf Einzelzellebene 19 Parameter gleichzeitig mit der oben erwähnten Durchflussgeschwindigkeit detektieren und 4 Subpopulationen gleichzeitig sortieren.

Zur Färbung der Zellen werden meist fluoreszenzfarbstoff-markierte Antikörper eingesetzt, die spezifisch Strukturen auf den Zellen erkennen und markieren. Durch geeignete Wahl und Zusammensetzung der einzelnen Marker mit unterschiedlichen Fluoreszenzfarbstoffen lassen sich in einem Färbeansatz theoretisch mehrere Dutzend Subpopulationen unterscheiden.

Die Zytometrie Core Facility am DKFZ berät und unterstützt als zentrale Serviceeinrichtung die Wissenschaftler in der Planung, Durchführung und Auswertung von FACS®-Analysen und Zellsortierung. Dazu stehen moderne Geräte, 7 Analysegeräte und 4 Zellsortierer, sowie verschiedene Softwaremodule zur Verfügung. Außerdem ist die Durchflusszytometrie Serviceeinheit an der Aus- und Fortbildung der DKFZ-Mitarbeiter und Doktoranden beteiligt. Das Kursangebot kann über die Abteilung Aus- und Weiterbildung eingesehen werden.

Die Nutzung der Analyse-Geräte ist zur Zeit nach vorheriger Schulung (Teilnahme am FACS®-Kurs bzw. Einweisung durch die Operatoren) und Anerkennung unserer Guidelines eigenverantwortlich. Die Bedienung der Zellsortier-Geräte obliegt ausschließlich den Operatoren. Zur Vereinbarung von Sort-Terminen senden Sie bitte ein ausgefülltes Sort-Request-Sheet an folgende E-Mail-Adresse: cytometry(at)dkfz-heidelberg.de.

Für DKFZ-Mitarbeiter sind weitere Informationen über unser Leistungsangebot und verfügbare Geräte-Ausstattungen im Intranet unter Wissenschaftliche Services - Zentrale Einheiten abrufbar.

Für weitere Fragen stehen wir selbstverständlich gerne zur Verfügung

Mitarbeiter:

Ann Atzberger:  Tel.: +49 (0)6221 42-3641
Jens Hartwig:   Tel.: +49 (0)6221 42-3640
Klaus Hexel:   Tel.: +49 (0)6221 42-3740

E-Mail: cytometry(at)dkfz-heidelberg.de

Letzte Aktualisierung: 04.10.2013 Seitenanfang